乳腺癌HER-2/neu（17q12）/TOP2A（17q21）/CSP17多色检测试剂盒说明书

乳腺癌HER-2/neu（17q12）/TOP2A（17q21）/CSP17多色检测试剂盒说明书

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疾控科研试剂博客

连|系：I99I–4747—I94

【预期用途】本品用于定性检测确诊为乳腺癌患者的石蜡包埋乳腺癌组织切片中的HER-2/neu基因扩增或TOP2A基因异常。HER2/neu基因（又名HER-2，c-erbB-2）酪氨酸激酶-人类表皮生长因子受体2，在20%～30%的乳腺癌患者中有基因的扩增和蛋白的过度表达。HER-2阳性的乳腺癌浸润性强，无病生存期短，预后差。临床研究结果显示依据HER-2基因状态分层后治疗有利于判断靶向药物疗效及评判患者生存期及预后。因此正确检测和评定乳腺癌的HER-2状态至关重要。荧光原位杂交被认为是检测乳腺癌HER-2基因扩增的“金标准”。TOP2A基因（Topoisomerase II alpha ，TOPIIα）编码DNA拓扑异构酶IIα，是核基质成分之一，在核内发挥作用。能调节核酸空间结构动态变化，参与DNA的复制、转录、重组及修复过程。TOP2A基因参与乳腺癌细胞的复制，存在TOP2A基因异常的患者预后差，无复发生存期缩短，尤其是TOP2A基因缺失的患者预后更差。基因扩增提示肿瘤有复发的可能，或者远期的疗效下降。临床试验结果显示TOP2A基因分层后治疗有利于延长乳腺癌患者的生存期。因此，正确检测和评定乳腺癌的TOP2A状态至关重要。本品以确诊为乳腺癌患者的石蜡包埋乳腺癌组织切片为检测对象，用荧光原位杂交的方法检测乳腺癌细胞中是否存在HER-2/neu基因（17q12）扩增或TOP2A基因（17q21）异常。本产品检测结果仅代表对HER-2和TOP2A基因的检测结果，可作为指导乳腺癌化疗及药物治疗的一项辅助检测手段，为临床医生个体化用药提供参考。

【检验原理】荧光原位杂交是一项在体外直接观察细胞中特定核酸的技术。根据碱基互补配对的原则，特定的DNA序列与细胞内的目标序列互补结合。由于探针带有荧光，在合适的激发光照射下，杂交探针及目标DNA能够在荧光显微镜下被清楚地观察到。本试剂盒提供3种探针，分别与17号染色体上的着丝粒区、HER-2/neu基因区段和TOP2A基因区段同源。杂交完成后单个细胞内相应区段的数量可以被清晰地显示。杂交包括以下几个步骤：首先需要将石蜡包埋的组织切片进行预处理；其次将DNA变性为单链，再与探针杂交；杂交完成后，通过一系列的洗涤，将多余的未结合的探针洗去，再用DAPI（4，6-二脒基-2-苯吲哚盐酸）将细胞核复染成蓝色；最后用荧光显微镜在合适的滤镜下观察探针及DAPI发出的荧光的信号。

【主要组成成分】组分名称 规格 数量 主要成分 10人份/盒 20人份/盒 HER-2/TOP2A杂交液 100μl/管 200μl/管 1管 GSP HER-2，GSP TOP2A、CSP17探针、甲酰胺、SSC、硫酸葡聚糖DAPI复染剂 100μl/管 200μl/管 1管 DAPI和抗褪色液

来源：疾控科研试剂