脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素 DON)对人和动物均有很强的毒性,能引起人和动物呕吐、腹泻、皮肤刺激、拒食、神经紊乱,且欧盟分类中将其归为三级致癌物。欧盟规定 DON 限量范围为 200-1750μg/kg,美国标准规定为 1000μg/kg。我国在《粮食卫生标准》(GB2715-2005)和《食品中真菌毒素限量》(GB2761-2011)标准中规定了小麦等制品 DON 的允许限量≤ 1000μg/kg。
安谱实验结合国标 GB 5009.111-2016 使用 CNW Poly-Sery HLB SPE 小柱,采用 HPLC-UV 的方法检测出食品中 DON,操作简便,相比于免疫亲和柱价格更具优势,并可作为免疫亲和柱之外的一种有力补充。
一、样品前处理
1
白酒基质空白:称取5 g 白酒于50 mL 离心管中,先氮吹,除去乙醇,然后用水稀释到10mL,待净化。
基质加标:在5g 白酒中加入呕吐毒素(使得最终上机浓度为1ppm),其它操作与基质空白相同。
2
面粉基质空白:称取2 g 已磨细混匀的细粉(精确至0.01 g)于50 mL 离心管中。加入20.0 mL 乙腈- 水溶液(84+16),用均质器均质1 min,超声10 min。10000 r/min 离心5 min。取4 mL上清液置于50 mL 离心管中,于40~50 ℃下氮气吹干后,加入4mL 水充分溶解残渣,待净化。
基质加标:在2g 面粉中加入呕吐毒素(使得最终上机浓度为1ppm),其它操作与基质空白相同。
二、小柱操作
小柱:CNW Poly-Sery HLB SPE 小柱
(SBEQ-CA3185 ,200 mg/6mL)
活化:3mL 甲醇;
平衡:3mL 水;
上样:待净化溶液(白酒样品10ml,面粉样品4ml)
淋洗:3 mL 水、1 mL5 % 甲醇- 水溶液依次淋洗柱子后彻底抽干
洗脱:4 mL 甲醇洗脱,收集全部洗脱液后在40~50 ℃下氮气吹干。加入1.0 mL 初始流动相溶解残留物,漩涡混匀10 s,用0.22 μm微孔滤膜过滤于进样瓶中,待进样。
三、HPLC-UV 测定条件
色谱柱:CNW Athena C18-WP
( LAEQ-461572,150mm*4.6*5um )
流动相:甲醇:水(20:80)
流速:1.0mL/min
柱温:35 ℃
进样量:20μL
检测波长:218nm
四、实验谱图
图1: 1 ppm 标准品谱图
图2:白酒基质空白谱图
图3:白酒基质加标1 ppm
图4:面粉基质空白谱图
图5:面粉基质加标1 ppm
五、实验数据
六、实验耗材
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来源:安谱实验
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