流行性脑膜炎检测试剂盒使用说明书

流行性脑膜炎检测试剂盒使用说明书

作|者:深圳市恒昊生物

联|系:I73–I806–9I87

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化ECM-A纯化抗原预包被板ELISA 原理,检测人血清/血浆中存在的流脑A群IgM抗体,并配以酶标记抗人IgM单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统(biotin-avidin system)的稳固级联放大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高。

[操作步骤]

1、试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。

2、样本稀释:用标本稀释液以1:41(5ul血清加入200ul的标本稀释液)稀释血清标本于反应板孔中,设阴、阳性对照(各100ul)及空白对照(加100ul标本稀释液)各一孔,轻拍混匀。

3、37℃温育30分钟。甩去孔内液体,用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。

4、加酶结合物:每孔2滴,混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。

[结果判断]

1.目测:在白色背景下观察各孔显色情况,兰色者为阳性,无色者为阴性。

2. 酶标仪测定:每孔加终止液一滴,混匀后在450nm下测定各孔O.D值。

① P/N=标本O.D值/阴性对照O.D值。

② P/N≥2.1为阳性;

③ P/N<2.1为阴性

④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计算, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算 ;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

[注意事项]

微孔板须密封防潮,从冷藏环境中取出时,应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用,余者封存置2-8℃。

来源:深圳恒昊生物科技

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