脑声常谈:动物抑郁行为实验手册丨糖水偏好实验测试方法与指标评价

糖水偏爱实验(sucrose preference test)是检测抑郁症的一个典型症状快感缺失的经典实验,是利用啮齿类动物对甜味的偏好而设计一种检测方法。 动物禁食一段时间后, 同时给予白水和低浓度蔗糖水,以动物对蔗糖水的偏嗜度(蔗糖偏嗜度)为指标检测动物是否出现快感缺失这一抑郁症状。

该实验在大鼠慢性应激 模型中应用最广泛,大鼠慢性不可预知性应激模型 的建立者Katz和大鼠慢性温和应激模型的建立者Willner 分别于1982年和1987年首次采用糖水实验检测抑郁模型动物是否出现快感缺失症状。此外,该实验为抗抑郁药物起效速率研究的最主要的行为学检测方法之一。

糖水偏好实验系统,XR-268 型,上海欣软

实验方法

大、小鼠糖水偏爱实验的操作方法上略有不同,对其分别进行总结如下:

(1) 大鼠糖水偏爱实验:

训练期:动物应单笼饲养,进行48h的蔗糖饮水训练。 前24h给予两瓶 1% ~ 2%蔗糖水,后24h,一瓶给予1%~2%蔗糖水,另一瓶给予饮用纯水(中途交换两个水瓶位置)。 大鼠禁食禁水14 ~ 23h后,进行糖水偏爱指数的测定:测定 1 h 内大鼠对两瓶水的饮用量(g)。

(2) 小鼠糖水偏爱实验:

操作流程同大鼠。但在48h饮水训练时,应全程给予1% ~ 2%蔗糖水和饮用水(中途交换两个水瓶位置)。 训练期结束后,禁水(不禁食)9~16h,测定8~15h内(中间宜交换两瓶位置1次) 小鼠对两瓶水的饮用量(g)。

评价指标

应采用蔗糖偏嗜度( sucrose preference)作为评价指标,蔗糖偏嗜度(%) = 蔗糖水饮用量/ (蔗糖水饮用量+饮用水饮用量)×100%。

抑郁行为判断标准:蔗糖偏嗜度低于0. 4或者与对照组相比有显著性减低(P< 0. 05)。

实验设备

整个实验需要用到一个Lickometer舔舐行为测试箱体(如图所示),整个箱体为聚碳酸酯材料,一端是不锈钢食槽,另一端有2个带有不锈钢小口的50mL聚碳酸脂饮水管子,上面有刻度读取相应溶液的体积,且易于取出进行清洗、测量和装溶液。箱体底部为不锈钢底板,为整个系统的舔舐行为的计数检测提供闭合回路。箱体外侧的计数器分别用于监测每个饮水管子单独的舔舐次数。如实验所需的舔舐液体种类少于三种,可用挡板进行隔开。

糖水偏好实验系统,XR-268 型,上海欣软

注意事项

1、应定期交替放置两个瓶子的位置,以消除侧面或位置偏爱的可能性。

2、可以在一整天或选定的时间段内测量蔗糖的偏爱。如果使用选定的时间段,则在整个动物中保持一致是很重要的,因为夜间节律会影响偏好行为。

3、可以用几种方式来计算结果测量值,包括消耗的溶液总毫升数(甜味与不甜的比例)或每克体重消耗的蔗糖克数。虽然这两个测量值通常在动物模型中相关,但后者可能会与压力和焦虑有关的饮食失调行为、体重减轻有关系。

4、大鼠或小鼠必须处于单笼条件下(即单独的笼子中)才能进行蔗糖偏爱测试。

5、在小鼠和大鼠的品系之间,在蔗糖偏爱方面也存在一些差异,比如Wistar大鼠不是特别敏感。

6、啮齿动物在蔗糖偏爱方面的可能还有性别差异,比如Wistar Kyoto雄性大鼠的蔗糖偏爱率低于雌性。

7、实验之前,动物单独饲养通常建议48-72小时的适应时间。

8、 为避免动物饮水量异常,应严格控制蔗糖溶液的浓度和测试时长等因素。

9、为避免其他因素对结果造成影响,建议使用蔗糖偏好比而不是绝对摄入量作为SPT的指示性参数。

10、 建议使用本方案中提到的舔舐行为测试箱体,可以避免饮水管子泄漏导致的实验误差;同时因为动物每次的饮水量很有限,在特定检测时长内若无法看出绝对摄入量的显著区别, 统计舔舐次数或许会有数据差异 。

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来源:脑声常谈

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