非标检测项目：婴幼儿配方奶粉中酪蛋白磷酸肽的测定

酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptide, CPP)是牛乳酪蛋白酶解产生的结构片段，其基本结构为-SerP-SerP-SerP-Glu-Glu- [1] 。

研究表明，CPP能与钙、锌、铁等微量元素形成可溶性复合物，促进人体小肠对矿物质的吸收，被誉为“矿物质载体” [2] 。此外，CPP还具有预防龋齿、促进牙齿及骨骼中钙的沉积和钙化、增强繁殖性能、诱导肿瘤细胞凋亡、增强机体免疫力以及促进体内益生菌增值等营养功能 [3] 。

2014年，国家标准GB31617-2014《食品安全国家标准 食品营养强化剂 酪蛋白磷酸肽》规定了CPP原料的检测方法，但对于婴幼儿配方奶粉中CPP的检测方法还处于空缺状态。

国内外关于CPP检测方法主要有氯化钡-乙醇沉淀法、毛细管区带电泳法、液相色谱-质谱联用法、高效液相色谱法等。

这些方法各有优劣，主要区别如下。

①氯化钡-乙醇沉淀法

此方法在现行国家标准GB31617-2014被使用。方法原理是在试样溶液中加入一定浓度的钡离子，钡离子在酪蛋白磷酸肽分子间形成桥连，在适当的温度和pH下，加入一定浓度的乙醇即可使桥连状的酪蛋白磷酸肽分子团沉淀下来，将沉淀干燥并称重，以此计算得到产品中酪蛋白磷酸肽的含量 [5] 。研究表明，此方法专属性较差，不可用于直接测定食品中CPP的含量。

②毛细管区带电泳法

毛细管区带电泳法的测定机理是在电场的作用下，缓冲溶液中的带电粒子以不同的速度向其所带电荷的相反方向移动，从而达到使分子分离的效果。毛细管区带电泳法应用于CPP含量检测，具有分离效果好、测定效率高及分辨率高的优点。缺点是当食品中含有高含量蛋白质或盐类成分时，容易对CPP的测定结果造成干扰，测定范围具有局限性 [6] 。

③液相色谱-串联质谱法

液相色谱-串联质谱法结合了高效液相色谱对不稳定组分良好的分离能力和质谱对被测组分的高鉴别能力的特点，即使面对复杂的检测成分，也具有良好的分离与鉴别效果，备受研究学者青睐。目前已有多篇研究报道将液相色谱-串联质谱法应用于检测婴幼儿奶粉中CPP的含量，具有前处理方便，灵敏度高的特点。美中不足的是仪器较为昂贵，检测成本较高，且CPP无固定分子量，质谱对其监测难度大 [7] 。

④高效液相色谱法

高效液相色谱法测定的过程中，溶质在固定相和流动相之间的连续多次交换，利用溶质在两相间分配系数、亲和力或分子大小不同等引起排阻作用差异，从而使不同溶质得以分离。目前已有多篇研究报道将高效液相色谱法应用于检测食品中CPP的含量，具有准确度高、灵敏度高、适用范围广的特点。

我院（深圳市计量质量检测研究院，SMQ）食品检测事业部在分析酪蛋白磷酸肽检测方法现状的基础上，根据样品中酪蛋白磷酸肽含量及样品基质组分，进一步改善了前处理条件，开发了ZDS JS1583-2021《食品中酪蛋白磷酸肽的测定 高效液相色谱法 作业指导书》。

参考文献

[1]王倩倩,杜鹃,冯凤琴. 不同水解度酪蛋白磷酸肽的理化性质和持钙能力比较[J]. 食品安全质量检测学报,2022,13(05):1438-1443.

[2]孙圣伟. 酪蛋白磷酸肽体内外活性对比及其促钙吸收机制研究[D].华南农业大学,2018.

[3]邵琪,魏丽娜,张东丽,等. 酪蛋白磷酸肽检测方法研究进展[J]. 食品研究与开发,2019,40(03):220-224.

[4]张永利,陶妃妃,杨雪,等. 酪蛋白磷酸肽在婴幼儿配方奶粉中的功能及其检测方法研究[J]. 现代食品,2020(01):174-179.

[5]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.GB 31617-2014食品安全国家标准食品营养强化剂酪蛋白磷酸肽[S]. 北京: 中国标准出版社, 2014: 3-4.

[6]王利民,郝艳红,王静,李景鹏. 毛细管区带电泳测定饲料添加剂中酪蛋白磷酸肽含量的方法研究[J]. 黑龙江畜牧兽医,2001(03):1-2.

[7]胡蓓,张京顺,柯星,蒋易蓉,等. 高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量[J]. 食品科学,2018,39(18):286-291.

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来源：一个小男孩的生活锦囊