天气逐渐转凉，儿童呼吸道感染逐渐增多，肺炎支原体（Mycoplasma pneumonia，Mp）作为儿童社区获得性肺炎（community-acquired pneumonia，CAP）的重要病原体，可占 CAP 的 10%~30%。
MP 是能够自我复制的，有能力在体外不依靠活体细胞而生存的最小微生物，由于其特殊的病原学特征，其实验室的检测方法多样，掌握不同检测方法的特点，依据不同需求和目的选择不同方法。
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常用检测手法
检测的手法主要包括病原学检测和血清学检测两大类
病原学检测
1）培养法：
【普通】用特殊的液体培养基进行 3～7 天培养，培养基变色后转入固体培养基继续培养至镜下见到 MP 典型菌落或经基因、生化鉴定后判定为 MP 阳性。
【快速检测试剂盒】MP 利用试剂中的高营养和快速生长因素迅速增殖，产酸使试剂 PH 降低，通过指示剂颜色变化来判断 MP 的存在。
2）MP 的直接检测：
采用免疫双抗夹心的方法标记鼠抗人 MP 单克隆抗体。
3）分子生物学：
【DNA】基于荧光定量 PCR 和环介导等温扩增（LAMP），靶标为 MP-DNA。
【RNA】基于核酸恒温扩增技术和实时荧光检测技术相结合的一种核酸检测方法，简称实时荧光恒温扩增技术。
血清学检测
分为 IgM、IgA、IgG 类抗体三类抗体。
支原体抗体在体内变化规律
图源：提供
抗体产生有时间窗和个体差异，但抗体检测不受抗生素治疗的影响。检测方法涉及酶联免疫吸附试验（ELISA）、颗粒凝集法（PA）、免疫胶体金技术（iGICT）、化学发光法（CLIA）、间接免疫荧光试验（IFA）。
PA 检测的是 IgM 和 IgG 的混合抗体，ELISA 分别检测 IgG 及 IgM,CA 法为非特异性诊断，MP 感染时阳性率仅 50%。
其他
MP 的培养要求苛刻，生长缓慢，不推荐临床实验室常规做体外药物敏感性试验。
推荐微量稀释法测定 MP 最低抑菌浓度。
23S rRNA 结构域 Ⅱ 区和 Ⅴ 区基因位点突变可导致抗生素与核糖体亲和力下降而引起耐药，结构域 Ⅴ 区 A2063 G、A2064 G 突变导致高水平耐药，A2067 G、C2617 G 突变发生低水平耐药。
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确诊检测流程
诊断推荐等级：
确诊检测流程
注：红色示确诊方法；紫色示初筛阳性，确诊需要病原学检测；黄色示疗效或复发评估
图 2 Mp 呼吸道感染实验室诊断流程图
图源：参考文献 [1]
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小测试
以下情况分别提示什么诊断？
1、颗粒凝集试验抗体滴度 ≥ 1∶160。
2、只有 IgM 抗体（+）。
3、只有 IgM 及 IgA（+）。
4、只有 IgG 抗体（+）。
5、IgM、IgG 及 lgA 均为（+）/IgM 及 IgG（+）/lgA 及 lgG（+）。
6、间隔 2～4 周双份血清抗体亚型转化/血清抗体水平 4 倍及以上增加或降低。
答案
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1、提示近期或现症感染。
2、提示近期感染。
3、提示现症感染。
4、提示既往感染。
5、提示现症感染或近期感染。
6、确诊 Mp 感染。
注意：免疫低下、缺陷人群，产生抗体能力较低的婴幼儿。可能不产生或产生低滴度的抗体。同时部分治愈患者体内会持续阳性。
策划：张洁
投稿：zhangjie4@dxy.cn
参考文献：
1. 中华检验医学杂志,2019,42(7):507-513
2. 中华实用儿科临床杂志 30(2015):1308.
来源：肿瘤病毒全知道
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