Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒,引用文献已达87篇

Absin Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒产品详情

1. 基本属性

Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒,引用文献已达87篇

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2. 产品描述

在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡最早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料, 它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V 与PI 匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。。

3. 操作步骤

贴壁细胞需用 0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加 2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用 1×PBS或 1×binding buffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。

(1) 用去离子水将 10×Binding Buffer 稀释成 1×Binding Buffer;

(2) 细胞收集:悬浮细胞收集:离心 5 分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后( 注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC 的结合),在室温中,2000rpm 离心 5~10 分钟,收集细胞;

(3) 细胞洗涤:用预冷 1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm 离心 5~10分钟,弃上清洗涤细胞;

(4) 加入 300μL 的 1×Binding Buffer 悬浮细胞;

(5) Annexin V-FITC 标记:加入 5μL 的 Annexin V-FITC 混匀后,避光,室温孵育 15 分钟;

(6) PI 标记:上机前 5 分钟再加入 5μL 的 PI 染色。

(7) 上机前,补加 200μL 的 1×Binding Buffer。

注意:每个反应体系建议细胞数为1×104至1×106个

4. 用法说明

(1) 使用前低速离心,以免液体积存管盖和管壁;

(2) 本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;

(3) PI(propidium iodide,溴化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;

(4) Annexin V-FITC 和 PI 是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;

(5) 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在 4℃下操作,以免影响细胞状态。

(6) 在细胞洗涤的最后一步,请尽量将上清弃净,以免 PBS 残留,有可能会影响实验结果。

(7) 为防止荧光衰变,宜在 1 小时内进行流式检测。

(8) PI 染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC 染色,最短可在上机前 5 分钟再加入 PI 染色。

Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒部分文献展示

  • MiR-27a-5p regulates acrylamide-induced mitochondrial dysfunction and intrinsic apoptosis via targeting Btf3 in rats
  • Lujia Zhang, Li Dong, Liuqing Yang, Yinghua Luo, Fang Chen
  • Food Chemistry. 2022 Jan 30 .
  • 影响因子: 7.27
  • Construction and investigation of β3GNT2-associated regulatory network in esophageal carcinoma
  • Zhiguo Luo, Qing Hu, Yuanhui Tang, Yahui Leng, Tian Tian, Shuangyue Tian, Chengyang Huang, Ao Liu, Xinzhou Deng, Li Shen
  • Cellular & Molecular Biology Letters. 2022 Jan 24 .
  • 影响因子: 5.787
  • Molecular mechanism of inhibitory effects of melatonin on prostate cancer cell proliferation, migration and invasion
  • Altannavch Nyamsambuu,Md. Asaduzzaman Khan,Xi Zhou,Han-Chun Chen
  • Plos one. 2022 Jan 21 .
  • 影响因子: 3.240
  • 山柰酚诱导人乳腺癌耐阿霉素细胞MCF-7/阿霉素凋亡的研究
  • 阿地力江·萨吾提; 木塔力甫·艾买提; 周文婷; 艾尼瓦尔·吾买尔
  • 中国临床药理学杂志. 2021/06/17 00:00:00 undefined undefined .
  • NADPH氧化酶激活介导NGF下调致心肌细胞凋亡
  • 杨宏
  • 山西医科大学. 2021/05/23 00:00:00 undefined undefined .
  • 霍山石斛花抗酒精性肝损伤活性成分筛选及其作用机制研究
  • 杨秀容
  • 合肥工业大学. 2021/04/01 00:00:00 undefined undefined .
  • Oxyresveratrol-induced Activation of Nrf2/HO-1 Signaling Pathway Enhances Ability of Resveratrol to Inhibit UVB-induced Melanin
  • Jia-Hui Jin, Yu-Yan Jiang, Yan Wang wangyan@tjutcm.edu.cn, Zhao-Wei Meng, Di-Hua Li, Lei Zhang, Hao Wang, Yan-Jun Zhang
  • Int J Dermatol Venereol. 2021 Dec 01 .
  • 影响因子: 1.964
  • Role of Episamarcandin in Promoting the Apoptosis of Human Colon Cancer HCT116 Cells through the PI3K-Akt Signaling Pathway
  • H Zhang, J Sun, R Ma, S Zhao
  • . 2021 Nov 02 .
  • Salvianolic acid A attenuates steroid resistant nephrotic syndrome through suPAR/uPAR-αvβ3 signaling Inhibition
  • Xin Lia, Dong Qi, Meng-ying Wang, Kai Ji, Qun-ling Xie, Yu Wang, Shi-hao Du, Hua-ying Fan
  • Journal of Ethnopharmacology. 2021 Oct 28 .
  • 影响因子: 4.27
  • Editing flagellin derivatives for exploration of potent radioprotective agents
  • Tong Shib, Jun Jiang, Meng Gao, Ronglin Ma, Xuejun Chen, Ruihua Zhang, Jianfu Xu, Weili Wang, Shujuan Xu, Xi Liu, Huizhen Zheng, Chen Wang, Liqin Li, Ruibin Li
  • European Journal of Pharmacology. 2021 Sep 15 .
  • MiR-27a-5p regulates acrylamide-induced mitochondrial dysfunction and intrinsic apoptosis via targeting Btf3 in rats
  • Lujia Zhang , Li Dong , Liuqing Yang , Yinghua Luo , Fang Chen
  • Food Chemistry. 2021 Aug 10 .
  • 影响因子: 7.514

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来源:爱必信生物

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